适用范围和特点:
1. 与目前最常用的转染试剂相比,转染效率更高。
2. 可适用于瞬时转染和稳定转染。
3. 细胞毒性低,且可通过瞬时转染增加蛋白表达量。
4. 有血清和无血清培养基均可使用,不受介质变化的影响,且转染后无需换液。
使用说明:
尽管以下转染的方法已经充分的验证过,此试剂具有高效的转染效率,但针对每种细胞,还是建议试验人员进行条件优化,通常要考虑以下问题:
1.细胞密度:大多数贴壁细胞密度在 50-70%之间,适合转染。确定转染最佳的细胞密度为每一个细胞类型的最大效率和维护密度在所有实验的重现性。
2.培养环境:含血清的培养基对 UltraFection 3.0 转染无影响。
3.本产品为-20℃保存,使用前建议分装冻存,尽量避免多次反复冻存对转染试剂的影响。
4.DNA 纯度和浓度要求:建议选用经过离子交换柱制备的高纯度、无菌的 DNA,去除 DNA 中内毒素的污染是保证最大转染效率的关键步骤。以 HEK293 细胞为例,24 孔板最适 DNA 转染浓度为每孔转染 0.5μg DNA。
5.UltraFection 3.0 和 DNA 的标准比例是 UltraFection 3.0 :DNA=3:1,即 3μl 的 UltraFection 3.0 对应加入 1μg的 DNA。但是推荐客户根据实验需要自行优化范围,即根据每 1μg DNA 的量调节 UltraFection 3.0 加入的量(2-8μl)。